تفاعل البوليميراز المتسلسل

من موسوعة العلوم العربية
مراجعة 15:58، 5 نوفمبر 2013 بواسطة إدارة الموسوعة 1 (نقاش | مساهمات) (مراجعة واحدة)
(فرق) → مراجعة أقدم | المراجعة الحالية (فرق) | مراجعة أحدث ← (فرق)
اذهب إلى التنقل اذهب إلى البحث
أنابيب بلاستيكية يحوي كل منها على 100μl من مزيج تفاعل PCR
جهاز اختبار تفاعل البوليميرز المتسلسل PCR

تفاعل البوليميريز المتسلسل (بالإنجليزية: Polymerase chain reaction) هي طريقة مستخدمة بكثرة في البيولوجيا الجزيئية. يشتق اسمه من إحدى عناصره الأساسية وهو دنا بوليميريز والذي يستخدم لتكثير و تكوين نسخ عديدة من قطعة من الدنا من خلال تناسخ إنزيمي خارج الكائنات الحية. عندما يتطور التفاعل، فإن الدنا المصنع يستخدم كقالب للتناسخ. وذلك يُنشط تفاعل متسلسل والذي يحدث فيه تكبير أسي لقالب الدنا. من الممكن، من خلال هذا التفاعل عمل ملايين النسخ لقطعة مفردة من الدنا أو عدة قطع. يمكن تعديل تفاعل البوليميريز المتسلسل لعمل تعديلات وراثية عديدة.

تستخدم كل تطبيقات تفاعل البوليميريز المتسلسل دنا بوليمريز مستقر حراريا، مثل تاك بوليمريز وهو إنزيم عزل من بكتريا المستحرة المائية. يعمل هذا الإنزيم على تجميع خيط دنا جديد من النيوكليوتيدات (مكعبات بناء الدنا)، وذلك باستعمال خيط دنا مفرد كقالب وقليلات النيوكليوتيدات (تسمى أيضا بوادئ الدنا) وهي مطلوبة لبدأ تصنيع الدنا. معظم طرق تفاعل البلمرة المتسلسل تستخدم التدوير الحراري بمعنى أنه يتم تسخين وتبريد عينة تفاعل البوليميريز المتسلسل وذلك طبقا لسلسلة خطوات حرارية محددة.

وضعت في عام 1983 من قبل كاري موليس ، والآن هذه التقنية لا يستغنى عنها في كثير من الأحيان ويتم استخدمها في مختبرات البحوث الطبية والبيولوجية لمجموعة متنوعة من التطبيقات وتشمل هذه استنساخ DNA المتسلسل المعتمدة على الحمض النووي , علم الوراثة العرقي ، أو التحليل الوظيفي من الجينات ، وتشخيص الأمراض الوراثية ، وتحديد بصمات الوراثية (المستخدمة في علوم الطب الشرعي و اختبار الأبوة )، وكشف وتشخيص الأمراض المعدية , في عام 1993، حصل على جائزة موليس على جائزة نوبل في الكيمياء مع مايكل سميث لعمله على PCR

المبادئ والطريقة

الخطوات

تحسين التفاعل

التطبيقات

عزل الدنا الجينومي

التكبير والتقدير الكمي للدنا

تشخيص الأمراض

التعديلات في التكنيك الأساسي

تاريخ

حروب براءات الاختراع

وصلات خارجية

الاستخدام

هناك لتفاعل البلمرة المتسلسل العديد من الاستخدامات لعل أهمها

  • استخدامات طبية على سبيل المثال في تشخيص بعض الأمراض وتحديد اعداد الفيروسات في الدم
  • تحديد البصمة الجينية لشخص ما في اطار الطب الشرعي
  • إثبات هوية الأب الحقيقي للمولود
  • استنساخ الجينات الوراثية

انظر أيضا